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固相萃取產品的選擇

時間:2015-05-04 14:27   點擊:13次

固相萃取產品的選擇

固相萃取簡介

Alltech公司Maxi-Clean和Extract-Clean固相萃取小柱為樣品分析前的準備提供快速和有效的純化和濃縮,為使這些產品獲得最佳的分析結果需要注意以下四個方面:

  1. 樣品的物理和化學特征:影響因素如被分析物相對于介質的極性,帶電荷的官能團,溶解性,分子量等等,決定了被分析物與填充床的結合強度。

  2. 選擇適當的保留方法:可能的方法有兩種:第一,被分析物不保留于填充床,而干擾物保留,如此純化了樣品。第二,被分析物保留于填充床,而干擾物不保留,或者在樣品洗脫前先從填充床上洗脫。當樣品需要濃縮時,常用的方法為此第二種方法。

  3. 選擇適當的填料和填充床大小:不同的填料類型提供不同的選擇性。填料類型應最大地利用被分析物和樣品中的干擾物的結構差異。選擇有適當選擇性的填料能獲得最高回收率和最高純度的樣品提取物。當填充床的大小未經優化時,通常有回收率低的問題。填充床太大時會導致洗脫不完全,而填充床太小時會導致保留不完全,兩種情況結果都是回收率比預期的低。

  4. 選擇合適的調節,沖洗和洗脫溶劑:必須注意各類溶劑相對于填料的洗脫強度(見下表)。上樣時的樣品調節溶劑應是沒有洗脫作用的“弱溶劑”,必須使用緩沖液來控制潛在的帶電荷化合物的離子化程度。沖洗溶劑應將弱保留的干擾物洗脫,但是洗脫強度不應太強而導致被分析物洗脫。洗脫溶劑的強度應足夠使被分析物在較小的體積下(1-2ml)完全洗脫。

    固相萃取的原理是基于液相色譜的原理,但它們的應用方式不同。在液相色譜中選擇的流動相應使樣品通過色譜柱時樣品中各組份與填料不斷相互作用,相互作用力不同(基于不同的化合物結構)使得樣品中各種組份于不同的時間從色譜柱上洗脫,從而分離和收集各組份。在固相萃取中,初始條件的選擇是讓樣品中的各組份完全保留在小柱上,而不是讓其與填料不斷相互作用,然后改變溶劑使其從填料上完全洗脫(最小相互作用)。因此而被稱為“數字式”或“開關式”色譜。


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